中華人民共和國衛(wèi)生檢疫總所關(guān)于印發(fā)《國境衛(wèi)生檢疫檢驗方法》和《國境衛(wèi)生檢疫檢驗規(guī)程》(試行)的通知
衛(wèi)檢總監(jiān)字〔1989〕第235號 1989年12月6日)
各衛(wèi)生檢疫所:
為加強國境衛(wèi)生檢疫檢驗工作,使其科學化、規(guī)范化、標準化,我們組織有關(guān)專業(yè)人員,整理了《國境衛(wèi)生檢疫檢驗方法》和制定了《國境衛(wèi)生檢疫檢驗規(guī)程》(試行),現(xiàn)發(fā)給你們參照執(zhí)行。望總結(jié)經(jīng)驗并將執(zhí)行過程中遇到的問題和改進意見及時報總所。
國境衛(wèi)生檢疫檢驗方法
目錄
一、健康檢查檢驗方法
(一)ABO血型檢驗方法
(二)谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢驗方法
(三)乙肝表面抗原檢驗方法
(四)食品飲用水從業(yè)人員帶菌檢查檢驗方法
(五)腹瀉病病原體檢驗方法
(六)紅細胞沉降率檢驗方法
二、禁止入境的傳染病檢驗方法
(一)梅毒血清抗體檢驗方法
(二)淋病雙球菌檢驗方法
(三)結(jié)核桿菌檢驗方法
(四)麻瘋桿菌檢驗方法
(五)艾滋病血清抗體檢驗方法(HIV檢驗方法)
三、檢疫傳染病檢驗方法
(一)鼠疫耶爾森氏菌檢驗方法
(二)霍亂弧菌檢驗方法
(三)黃熱病病毒檢驗方法
四、監(jiān)測傳染病檢驗方法
(一)流感病毒檢驗方法
(二)瘧原蟲檢驗方法
(三)斑疹傷寒立克次體檢驗方法
(四)回歸熱螺旋體檢驗方法
(五)登革熱病毒檢驗方法
(六)流行性出血熱病毒檢驗方法
(七)脊髓灰質(zhì)炎病毒檢驗方法
(八)天花病毒檢驗方法
(九)埃波拉馬爾堡病毒檢驗方法
(十)拉沙熱病毒檢驗方法
(十一)軍團菌檢驗方法
五、食品衛(wèi)生檢驗方法和標準(詳見《中華人民共和國食品衛(wèi)生標準》)
(一)糧食衛(wèi)生標準
(二)食用植物油衛(wèi)生標準
(三)鮮肉衛(wèi)生標準
(四)凍肉衛(wèi)生標準
(五)咸肉衛(wèi)生標準
(六)熟肉制品衛(wèi)生標準
(七)鮮蛋衛(wèi)生標準
(八)加工蛋制品衛(wèi)生標準
(九)乳及乳制品衛(wèi)生標準
(十)茶類衛(wèi)生標準
(十一)糖類衛(wèi)生標準
(十二)糕點、餅干、面包衛(wèi)生標準
(十三)冷飲食品及汽酒衛(wèi)生標準
(十四)罐頭衛(wèi)生標準
(十五)水產(chǎn)品衛(wèi)生標準
(十六)調(diào)味品衛(wèi)生標準
(十七)醬腌菜衛(wèi)生標準
(十八)豆制品及淀粉類衛(wèi)生標準
(十九)蒸餾酒及配制酒衛(wèi)生標準
(二十)發(fā)酵酒衛(wèi)生標準
(二十一)食品添加劑使用衛(wèi)生標準
(二十二)食品中氟允許量標準
(二十三)食品中鎘允許量標準
(二十四)食品總砷、無機砷允許量標準
(二十五)食品中汞允許量標準
(二十六)糧食、蔬菜、肉、蛋等食品中“六六六”、“滴滴涕”衛(wèi)生標準
(二十七)食品中甲拌磷、希螟硫磷、倍硫磷殘留量衛(wèi)生標準
(二十八)食品中敵敵畏、樂果、馬拉硫磷、對硫磷允許殘留標準
(二十九)食品中黃曲霉毒素B1允許量標準
(三十)熏烤動物性食品中苯并芘允許限量標準
(三十一)食具容器包裝材料衛(wèi)生標準
六、餐茶具衛(wèi)生檢驗方法
七、生活飲用水衛(wèi)生要求
八、食品貯藏衛(wèi)生要求
九、環(huán)境衛(wèi)生要求
(一)污水排放衛(wèi)生要求
(二)空氣衛(wèi)生要求
(三)餐茶具洗滌消毒衛(wèi)生要求
(四)供水設(shè)備衛(wèi)生要求
一、健康檢查檢驗方法
(一)ABO血型檢驗方法
1、方法
玻片凝集法
標準血清系指用抗A抗B單克隆標準抗血清
2、結(jié)果判定
────────────┬───────────────────────
標準血清 │ 凝集現(xiàn)象
────────────┼───────────────────────
抗A │+ ?。 。 。?/p>
抗B │- + ?。 。?/p>
受檢者血型 │A B AB O
────────────┴───────────────────────
+凝集?。撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸摺?-不凝集
────────────────────────────────────
(二)谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢驗方法
1 方法
GPT賴氏法
2 結(jié)果判定
────────────┬───────────────────────
方法 │正常值
────────────┼───────────────────────
賴氏法 │0-25單位
────────────┴───────────────────────
(三)乙型肝炎表面抗原檢驗方法
1 方法
1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
1.2 反向間接血凝反應(yīng)(RPHA)
2 結(jié)果判定
───┬────────────────────┬───────────
方法 │ 血球凝集反應(yīng) │
├────────────────────┤結(jié)果判定
│1:2 1:4 1:8 1:8以上│
───┼────────────────────┼───────────
反向間│++↑ ?。?uarr; ?。?uarr; ?。?uarr; │陽性(++)
接血凝│++↑ ++↑ ?。?uarr; ?。?darr; │可疑(+-)
反應(yīng) │++↑ ?。?uarr; ?。?darr; ?。 々﹃幮裕ǎ?/p>
───┴────────────────────┴───────────
+凝集 ↑以上 ↓以下
必要時作中和試驗
────────┬────────────────┬──────────
方法 │ 判定方法 │結(jié)果判定
────────┼────────────────┼──────────
酶聯(lián)免吸附試驗 │目測:棕黃色 │陽性
│比色: │≥2.1:陽性
│ 樣品OD值 │<2.1:陰性
│PN=─────────────│
│ 陰性對照平均OD值 │
────────┴────────────────┴──────────
(四)食品飲用水從業(yè)人員帶菌檢查檢驗方法
1 項目
霍亂弧菌、志賀氏菌、沙門氏菌
2 方法
增菌,分離培養(yǎng),生化學、血清學鑒定
3 結(jié)果
不得檢出
(五)腹瀉病病原體檢驗方法
1 項目
霍亂弧菌、志賀氏菌、沙門氏菌、副溶血性弧菌、致病性大腸桿菌、侵襲性大腸桿菌、產(chǎn)毒性大腸桿菌、空腸彎曲菌、結(jié)腸炎耶爾森氏菌、輪狀病毒
2 方法
增菌、分離、培養(yǎng)、鑒定
3 結(jié)果
檢出××病原體;××病原體未檢出。
(六)紅細胞沉降率檢驗方法
1 方法
魏氏法
2 結(jié)果判定
────────┬───────────────────────────
方法 │正常檢驗指標
────────┼───────────────────────────
魏氏法 │男性 0-15mm/H
│女性 0-20mm/H
────────┴───────────────────────────
二、禁止入境的傳染病檢驗方法
(一)梅毒血清抗體檢驗方法
1 方法
1.1 血清反應(yīng)素試驗(USR)
1.2 梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)
1.3 熒光螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)
2 結(jié)果判定
2.1 USR
────────────────────────────────────
反應(yīng)程度 結(jié)果判定
────────────────────────────────────
中等或大的塊狀物 陽性反應(yīng)(++)↑
顆粒不規(guī)則細小粒狀 弱陽性反應(yīng)(+-)
均勻分布無塊狀物 陰性反應(yīng)(-)
────────────────────────────────────
2.2 TPHA
────────────────────────────────────
陽性 ?。?:80
可疑 1:80(+-)需復(fù)驗
陰性 ?。?:80
────────────────────────────────────
2.3 FTA-ABS
────────────────────────────────────
熒光強度 結(jié)果判定
────────────────────────────────────
翠綠色熒光(++)↑ 陽性
黃綠色熒光(+) 可疑
熒光不顯(+-) 陰性
────────────────────────────────────
健康檢查USR陽性時,需做TPHA,陽性時才能確診。
(二)淋病雙球菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片染色鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 生化試驗鑒定
2 結(jié)果判定
2.1 形態(tài)特點:卵圓形或圓形,成對排列常位于細胞中。
2.2 菌落半透明灰白色邊緣花瓣狀。
2.3 生化試驗:過氧化氫酶,氧化酶陽性葡萄糖產(chǎn)酸即可判定。
(三)結(jié)核桿菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片抗酸染色鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 動物試驗
2 結(jié)果判定
2.1 檢出抗酸性菌。
2.2 3-4周生長粗糙型菌落為陽性。
2.3 動物試驗3-4周接種部位附近淋巴結(jié)腫大為陽性。
(四)麻瘋桿菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片抗酸染色鏡檢100個視野
1.2 動物試驗
1.3 麻瘋菌素反應(yīng)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢結(jié)果
2.1.1 陰性(-):檢查100個視野無麻瘋桿菌。
2.1.2 陽性(+):每個視野查到1個或<1個麻瘋桿菌。
2.1.3 陽性(++):每個視野均可查到麻瘋桿菌。
2.1.4 陽性(+++):每個視野均可查到許多麻瘋桿菌。
2.2 動物試驗:豚鼠接種不發(fā)病。
2.3 麻瘋菌素反應(yīng):出現(xiàn)紅斑>10mm為陽性。
(五)艾滋病血清抗體檢驗方法
1 項目
HIV抗體檢測
2 方法
2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2.2 間接免疫熒光試驗(IFA)
2.3 明膠顆粒凝集試驗(PA)
2.4 蛋白印跡試驗(WB)
3 結(jié)果判定
3.1 ELISA:OD值≥cOT OFF值表示有反應(yīng),應(yīng)復(fù)驗1次,如重復(fù)陽性,可認為HIV抗體陽性。
3.2 IFA:細胞漿和細胞膜呈綠色熒光為陽性。
3.3 PA:
────────────────────────────────────
陽性(+) 1:32 發(fā)生顆粒凝集
可疑(+-) ?。?:32 顆粒凝集不顯
陰性(-) 均不發(fā)生凝集反應(yīng)
────────────────────────────────────
3.4 WB:出現(xiàn)P24或GP41帶形,同時出現(xiàn)其他帶形,為陽性,即可確診。
三、檢疫傳染病檢驗方法
(一)鼠疫耶爾森氏菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)鑒定
1.3 噬菌體試驗
1.4 動物試驗
1.5 沉淀反應(yīng)
1.6 被動血凝試驗
1.7 反向血凝試驗
1.8 抗體中和試驗
1.9 免疫熒光檢查
2 結(jié)果報告
2.1 初報:2小時內(nèi)涂片染色報告。
2.2 疑似報告:36小時內(nèi)報告形態(tài)、血清學試驗、噬菌體試驗結(jié)果。
2.3 最終報告:初發(fā)鼠疫于72小時內(nèi)經(jīng)四步檢查結(jié)果報告。
(二)霍亂弧菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片、染色
1.2 動力觀察及制動試驗
1.3 分離培養(yǎng)
1.4 生化試驗
1.5 血清學試驗
1.5.1 玻片凝集試驗
1.5.2 試管定量凝集試驗
1.6 噬菌體試驗
2 結(jié)果報告
2.1 初報:涂片形態(tài)動力觀察制動試驗2小時內(nèi)報告。
2.2 疑似報告:增菌培養(yǎng)狀況,玻片凝集試驗10小時內(nèi)報告。
2.3 初步鑒定:結(jié)合形態(tài)、培養(yǎng)性狀,18小時內(nèi)報告。
2.4 確定報告:根據(jù)鑒定試驗、鑒別試驗,48小時內(nèi)報告。
(三)黃熱病病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 雞胚接種
1.1.3 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 抗體中和試驗
1.2.2 補體結(jié)合試驗
1.2.3 血凝及血凝抑制試驗
1.3 病理組織切片
2 結(jié)果判定
2.1 初步鑒定報告:動物試驗,血清學試驗呈陽性反應(yīng),中和指數(shù)>50。雙份血清滴度增高4倍以上。
2.2 最終確定報告:分離病毒,傳代實驗動物的血清學試驗及病理組織學切片檢查結(jié)果。
四、監(jiān)測傳染病檢驗方法
(一)流感病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 雞胚接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 血凝及血凝抑制試驗
1.2.2 紅細胞吸附及吸附抑制試驗
1.2.3 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
1.3 免疫熒光抗體快速診斷
2 結(jié)果判定
2.1 快速診斷:直接涂片熒光染色,熒光細胞3個以上為陽性,1至2個為可疑,無特異熒光為陰性。
2.2 分離出病毒,用已知標準免疫血清確定甲、乙、丙三型和亞型。
2.3 血清學試驗:雙份血清抗體滴度比增長4倍為陽性。ELISA雙份血清滴度比增長4倍為陽性。ELISA雙份血清滴度比值的負對數(shù)ED值>0.5為陽性,<0.1為陰性。
(二)瘧原蟲檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 血清學試驗
1.2.1 瓊脂擴散試驗
1.2.2 被動血凝試驗
1.2.3 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 涂片找到各期瘧原蟲,應(yīng)報告發(fā)育時期及瘧原蟲的種類。
2.2 瓊脂擴散試驗形成白色沉淀線為陽性。
2.3 標準瘧原蟲抗原致敏血球,與被測血清所凝集為陽性。
2.4 免疫熒光陽性:呈明亮熒光。
2.5 ELISA陽性:形成復(fù)合物而顯黃棕色。
(三)斑疹傷寒立克次氏體檢驗方法
1 方法
1.1 直接檢查法
1.1.1 姬氏染色法
1.1.2 免疫熒光染色
1.2 病原體分離
1.2.1 豚鼠接種
1.2.2 雞胚接種
1.3 血清學試驗
1.3.1 外斐氏反應(yīng)
1.3.2 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.3.3 間接血凝試驗
1.3.4 間接免疫熒光試驗(IFA)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢:立克次體短小、單個、成雙或成堆紅色,熒光染色呈黃綠色熒光。
2.2 豚鼠呈發(fā)熱反應(yīng),直接檢查可查立克次體,臟器懸液為抗原做血清反應(yīng),呈陽性。
2.3 雞胚卵黃囊膜涂片,可查出立克次體。
2.4 血清學試驗:雙份血清滴度增高4倍以上為陽性。外斐氏反應(yīng)>1:160有診斷意義,補體結(jié)合試驗>1:8,間接血凝試驗>1:400,間接免疫熒光試驗呈綠色熒光顆粒為陽性。
(四)回歸熱螺旋體檢驗方法
1 方法
1.1 直接檢查
1.2 染色鏡檢
1.3 動物接種
1.4 雞胚接種
2 結(jié)果判定
───────────┬────────────────────────
方法 │ 結(jié)果判定
───────────┼────────────────────────
鏡檢 │發(fā)現(xiàn)有柔軟長絲狀,具有5-7個不規(guī)則疏松螺旋體
雞胚或動物接種 │發(fā)現(xiàn)有螺旋體生長
───────────┴────────────────────────
(五)登革熱病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 乳鼠接種
1.2 中和試驗
1.3 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.4 血凝抑制試驗
2 結(jié)果判定
────────┬───────────────────────────
方法 │ 結(jié)果判定
────────┼───────────────────────────
中和試驗 │單份血清中和指數(shù)>50為陽性
補體結(jié)合試驗 │效價≥1:32為陽性,恢復(fù)期血清比急性期血清增長4倍。
血凝抑制試驗 │效價≥1:2560為陽性,恢復(fù)期比急性期血清增長4倍。
────────┴───────────────────────────
(六)流行性出血熱檢驗方法
1 方法
1.1 間接免疫熒光試驗
1.2 血凝抑制試驗
2 結(jié)果判定
2.1 間接免疫熒光:血清滴加抗原片上出現(xiàn)翠綠色熒光顆粒為陽性。
(七)脊髓灰質(zhì)炎病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 中和試驗
1.2.2 ELISA
1.3 免疫熒光法快速診斷
2 結(jié)果判定
2.1 小白鼠接種:出現(xiàn)典型癥狀或有規(guī)律死亡為陽性。
2.2 組織培養(yǎng):病變(++)細胞>50%為陽性。
2.3 中和試驗:雙份血清滴度增長4倍。
2.4 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
2.5 快速診斷:DFA:陽性時胞漿中呈彌散性翠綠色熒光,部分顆粒性,有的呈大球形熒光包涵體。
(八)天花病毒檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 病毒分離
1.2.1 雞胚接種
1.2.2 動物試驗
1.3 血清學試驗
1.3.1 絮狀沉淀試驗
1.3.2 血凝抑制試驗
1.3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢:天花病毒原生小體大量存在,判定為陽性。
2.2 雞胚接種:痘斑試驗陽性,絨毛尿囊膜有白點病灶。
2.3 動物試驗:鮑氏試驗陽性,家兔角膜吳透明小圓泡炎癥變化。
2.4 血清學試驗:雙份血清滴度增高4倍,絮狀沉淀試驗:呈現(xiàn)絮狀沉淀為陽性。
(九)埃波拉馬爾堡病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 動物試驗:小白鼠、豚鼠、猴皆能發(fā)病。
2.2 VERO單層細胞:陽性時細胞病變病毒生長。
2.3 IFA:血清抗體陽性,出現(xiàn)翠綠色熒光顆粒。
2.4 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
(十)拉沙熱病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 中和試驗
1.2.2 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 動物試驗:小白鼠4日后發(fā)病死亡。
2.2 組織培養(yǎng):VERO-E6細胞產(chǎn)生病變,單個細胞壞死,分布不均,呈巢穴狀。
2.3 中和試驗:小白鼠中和指數(shù)<9為陰性,>50為陽性。雙份血清明顯增長。蝕斑抑制中和試驗:蝕斑減少>80%為陽性。
2.4 IFA:陽性時在細胞漿內(nèi)呈點狀顆粒狀熒光,或分布在核內(nèi)。
2.5 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
(十一)軍團菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 動物接種
1.4 血清學試驗
1.4.1 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.4.2 微量凝集試驗(MAT)
1.4.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 姬美耐染色:菌體為紅色,鍍銀染色呈黑棕色,多形性桿菌狀,多數(shù)在吞噬細胞內(nèi)。DFA染色呈亮綠熒光。
2.2 CO2中培養(yǎng)5天,灰白、濕潤、有光澤、質(zhì)軟菌落,產(chǎn)褐色素,明膠液化,水解馬尿酸,氧化酶陽性。
2.3 血清學試驗:雙份血清呈4倍增長,≥1:128為陽性,MAT抗體滴度>1:16為陽性。ELISA校正OD值≥0.3為陽性。
六、餐茶具衛(wèi)生檢驗方法
1 方法
1.1 濾紙貼附法
1.2 生理鹽水洗滌、涂擦法
2 項目與指標
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
細菌總數(shù) │<20個/平方厘米
大腸菌群 │不得檢出/50平方厘米
────────────┴───────────────────────
七、生活飲用水衛(wèi)生要求
1 項目
1.1 感官性狀
1.2 細菌學檢查
1.3 理化檢查
2 水質(zhì)標準和衛(wèi)生要求
────────────┬───────────────────────
項目 │ 標準
────────────┼───────────────────────
1.感官性狀和一般化學 │
指標: │
色 │色度不超過15度,并不得呈現(xiàn)其它異色
混濁度 │不超過3度,特殊情況不超過5度
溴和味 │不得有異嗅、異味
肉眼可見物 │不得含有
PH │6.5-8.5
總硬度 │450mG/L
?。ㄒ蕴妓徕}計) │
鐵 │0.3mG/L
錳 │0.1mG/L
銅 │1.0mG/L
鋅 │1.0mG/L
揮發(fā)酚類 │0.002mG/L
(以苯酚計) │
陽離子合成洗滌劑 │0.3mG/L
硫酸鹽 │250mG/L
氯化物 │250mG/L
溶解性總固體 │1000mG/L
2.毒理學指標: │
氟化物 │1.0mG/L
氰化物 │0.05mG/L
砷 │0.05mG/L
硒 │0.01mG/L
汞 │0.001mG/L
鎘 │0.01mG/L
鉻(六價) │0.05mG/L
鉛 │0.05mG/L
銀 │0.05mG/L
硝酸鹽(以氮計) │20mG/L
氯仿 │60UG/L
四氯化碳 │3UG/L
苯并(A)芘 │0.01UG/L
滴滴涕 │1UG/L
六六六 │5UG/L
3.細菌學指標: │
細菌總數(shù) │小于100個/mL
總大腸菌群 │小于3個/L
游離余氯 │末梢水不應(yīng)低于0.05mG/L在接觸30分鐘
│后不低于0.3mG/L
4.放射性指標: │
總α放射性 │0.1Bq/L
總β放射性 │1Bq/L
────────────┴───────────────────────
八、食品貯藏衛(wèi)生要求
1 項目
1.1 溫度
1.2 濕度
2 溫、濕度指標
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
冷凍食品:溫度 │-10―-12℃
相對濕度 │85%-92%
魚肉暫存:溫度 │0-3℃
相對濕度 │85%-88%
蛋品:溫度 │1-3℃
相對濕度 │85%-88%
水果、蔬菜:溫度 │7-10℃
相對濕度 │85%-95%
牛乳 │5-7℃
糧油干貨 │陰涼干燥,溫度最高允許28℃
消毒后食品,開罐食品、 │5-7℃
牛乳及熟食品 │
────────────┴───────────────────────
九、環(huán)境衛(wèi)生檢驗要求
?。ㄒ唬┪鬯欧判l(wèi)生要求
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
五日生化需氧量 │ ≤ 50
懸浮物 │ ≤ 150
大腸菌群 │ ≤ 250個/100mL
────────────┴───────────────────────
(二)空氣衛(wèi)生要求
────────────────────────────────────
項目 指標
────────────────────────────────────
二氧化碳(mG/立方米) ≤0.15
一氧化碳(mG/立方米) ≤10
細菌總數(shù)(個/立方米)
夏季 ≤4500
冬季 ≤6000
甲、乙鏈球菌(個/立方米) ≤36
────────────────────────────────────
(三)餐茶具洗滌消毒衛(wèi)生要求
────────────────────────────────────
項目 指標
────────────────────────────────────
蒸汽柜溫度 77℃ 15分
91℃ 5分
洗滌熱水溫度 >77℃
洗手水溫度 43-49℃
────────────────────────────────────
(四)供水設(shè)備衛(wèi)生要求
每月消毒一次,游離余氯0.2PPm,不少于20分。
國境衛(wèi)生檢疫檢驗規(guī)程
(試行)
一、檢驗工作任務(wù)和內(nèi)容
檢驗工作是衛(wèi)生檢疫一項技術(shù)性很強的工作。其主要任務(wù)是:為檢疫查驗、傳染病監(jiān)測、衛(wèi)生監(jiān)督、衛(wèi)生處理、隔離、留驗、醫(yī)療急救等工作及時、準確地提供檢驗結(jié)果和監(jiān)測數(shù)據(jù),為衛(wèi)生檢疫工作提供科學依據(jù)。
檢驗工作的主要內(nèi)容:
(一)負責現(xiàn)場樣品采集工作,及時檢驗,報告檢驗結(jié)果以及簽發(fā)檢驗單證。
(二)對檢疫傳染病和監(jiān)測傳染玻救各種病原體微生物進行分離和鑒定。
(三)地國境口岸和入出境交通工具上的食品、飲用水進行細菌學和理化檢驗。
(四)負責國境口岸的醫(yī)學動物所帶病原體的分離和鑒定。
(五)負責健康檢查的檢驗工作。
(六)負責國境口岸的醫(yī)療急救及門診的臨床檢驗工作。
(七)負責進口食品檢驗工作。
(八)開展有關(guān)疾病監(jiān)測、衛(wèi)生監(jiān)督和衛(wèi)生處理等科學研究工作。
二、實驗室規(guī)章制度
(一)微生物實驗室
1.設(shè)無菌接種室、培養(yǎng)基制作室、洗滌消毒室、微生物檢查室等。
2.室內(nèi)光線要充足,空氣流通,溫、濕度適宜,安靜清潔,無蚊、無蠅。
3.實驗室出入口放置腳擦墊,用消毒液浸泡,進入室內(nèi)必須穿白大衣,戴白帽,換拖鞋,作好自身防護。
4.遵守各項實驗操作規(guī)程,操作危險活菌應(yīng)在固定地點進行,臺面要鋪好浸泡消毒溢的紗布墊,工作完畢將紗布墊浸泡在消毒液中,并消毒洗手。
5.吸取標本必須用有橡皮吸頭、塞有棉花的無菌吸管,用過的吸管放在消毒液中。
6.用過的染菌器材和污物經(jīng)滅菌處理后,方可遺棄。
7.打破染菌器材時,應(yīng)迅速采取適當消毒措施,對污染點進行消毒,并向領(lǐng)導(dǎo)報告。
8.需要保留的菌種,應(yīng)按菌種保管要求妥善保存。不得隨意送出。
(二)強毒菌檢驗室
1.強毒菌檢驗室,應(yīng)有嚴格的防鼠、防蚤設(shè)施。
2.強毒菌檢驗必須雙人操作,檢驗人員要穿好防護服裝。
3.已知毒菌種的動物接種、解剖或菌種密封,檢驗人員要戴有機玻璃面罩或眼鏡。
4.工作完畢后,檢驗人員必須做終末消毒,方準離開實驗室。
(三)病毒檢驗室
1.設(shè)有隔離的實驗室,一切有污染性的實驗應(yīng)在指定實驗室內(nèi)進行。
2.進入實驗室必須穿工作服、換鞋。操作中所用材料和器械必須就地進行消毒處理,實驗完畢作終末消毒后,方準離開實驗室。
3.實驗室必須安裝紫外線消毒設(shè)備,實驗前后均用紫外線照射30分鐘以上。
4.發(fā)生病毒污染時,立即采取有效措施進行處理,并向領(lǐng)導(dǎo)匯報。
(四)理化檢驗室
1.設(shè)化學分析室、儀器分析室、秤量室等。要求清潔整齊,溫、濕度適宜。
2.定量器材在使用前應(yīng)按規(guī)定進行清洗、校正,試劑的純度符合檢驗要求。
3.劇毒、易燃、易爆品應(yīng)專人保管,防止發(fā)生事故。
4.要嚴格按操作規(guī)程使用儀器,定期對儀器進行維修檢查。
5.測定樣品時,必須做平等實驗,取平均值計算報告。
(五)臨床檢驗室
1.室內(nèi)保持清潔安靜。操作嚴肅認真,按操作規(guī)程進行。
2.采血時,要態(tài)度和藹,動作輕快,注意安全。
3.檢驗報告,應(yīng)按規(guī)定時間發(fā)出。急診報告優(yōu)先發(fā)出。
4.發(fā)現(xiàn)重要意義的檢驗結(jié)果,應(yīng)立即通知體檢工作人員,以便及時處理,并向領(lǐng)導(dǎo)匯報。
(六)免疫檢驗室
1.室內(nèi)光線充足,溫、濕度適宜,有足夠電源插座。
2.實驗應(yīng)選擇特異性強、靈敏度高的特異性診斷血清、試劑盒的方法。
3.血清、免疫學實驗存在多種干擾因素,易出現(xiàn)假陽性,必要時進行復(fù)驗
,并進一步做確證實驗。
4.洗滌血球一定要洗滌三次。血球上清液不得有溶血跡象,補體使用時在做正式實驗同時,必須做補體效價滴定。
5.實驗用的玻璃器材需仔細選擇,選用中性、硬質(zhì)玻璃器材,能耐酸、耐高溫、透明度強,以利于觀察結(jié)果。
(七)動物實驗室
1.實驗動物應(yīng)由專職人員進行標準化飼養(yǎng)、繁殖。室內(nèi)應(yīng)保持清潔整齊和適宜溫、濕度,無鼠、無蚊、無蠅。
2.選擇符合實驗要求的純種、健康動物,進行單獨飼養(yǎng),嚴格消毒,隔離及檢疫。
3.動物實驗必須按照實驗操作規(guī)程或?qū)嶒炘O(shè)計進行。
4.實驗動物要進行分組編號,標記在不易脫落、明顯的部位。實驗動物用的容器應(yīng)有明顯的標簽,每天核對動物數(shù)目,如有減少,查明原因并及時處理。
5.實驗用過的動物,不準放回動物飼養(yǎng)室。
(八)病媒昆蟲實驗室
1.設(shè)飼養(yǎng)室和標本制作鑒定室,室內(nèi)應(yīng)有嚴格的防鼠、防蚤措施,防止其他昆蟲侵入室內(nèi)。
2.飼養(yǎng)室應(yīng)設(shè)有恒溫、恒濕裝置。備有遮光用的黑布窗簾。飼養(yǎng)器應(yīng)充足,固定專用。
3.飼養(yǎng)室有給水設(shè)備,給水必須隔夜脫氯,但不能超過兩天以上,殺蟲劑及其他揮發(fā)性藥物均不得攜入飼養(yǎng)室內(nèi)。
4.要詳細填寫飼養(yǎng)記錄,并注明飼養(yǎng)條件。
5.標本制作鑒定室應(yīng)溫度適宜、干燥,光線充足。標本有防霉、防蟲措施。定期檢查標本情況。
(九)毒理實驗室
1.室內(nèi)應(yīng)清潔整齊,無蠅、無鼠,發(fā)現(xiàn)鼠類禁用毒餌除鼠。進入室內(nèi)要穿工作服。
2.實驗動物應(yīng)選擇標準動物,選用標準飼料。一次實驗用全程飼料,備齊后方可開始實驗。
3.應(yīng)按實驗操作規(guī)程和實驗設(shè)計進行毒理學實驗,選用的方法靈敏、可靠。
4.實驗動物容器應(yīng)備有卡片,標明編號、分類編目、記錄進程和實驗內(nèi)容。
5.實驗動物應(yīng)按有標準毒物、無標準毒物及未知毒物等分類,認真觀察,每天詳細填寫實驗記錄。
6.毒理實驗樣品應(yīng)注意驗收、保存和使用。樣品中不得混有化學藥物和防腐劑。易變質(zhì)樣品應(yīng)及時冰凍、冷藏保存。
三、檢驗技術(shù)規(guī)程
(一)檢驗人員的管理
1.檢驗工作是科學性很強的工作,從事檢驗工作的人員要具有一定的政治和業(yè)務(wù)素質(zhì)及認真負責,實事求是的科學作風。
2.檢驗人員要經(jīng)常學習、吸收先進檢驗技術(shù),掌握各種檢驗理論和方法,熟悉各種實驗操作技術(shù)及注意事項,掌握常用儀器的原理、性能、構(gòu)造、使用和維護。
3.操作前做好檢驗項目、樣品和送檢單的核對。認真按照實驗規(guī)程操作,保證實驗結(jié)果的準確。
4.檢驗工作經(jīng)常接觸有毒、有害、有傳染性的樣品,檢驗人員要嚴格執(zhí)行各種操作規(guī)程,做好防護,加強消毒。
(二)樣品的采集、送檢和處理
1.采樣
(1)檢驗人員負責現(xiàn)場采樣工作,并做好采樣調(diào)查記錄,無采樣記錄的樣品,不得接受檢驗。
(2)采取細菌學檢驗的樣品,應(yīng)按無菌操作規(guī)程進行,并加強自身防護及防止病原菌傳播。
(3)采取數(shù)量以能反映被檢物的衛(wèi)生質(zhì)量和檢驗項目對樣品的需求為準。
(4)采取的樣品,呆具有代表性、均勻性。均質(zhì)樣品用3層5點方法采?。煌磕吮緫?yīng)多點采樣;各種水樣不少于1000毫升;尸體標本應(yīng)在死后6小時內(nèi)采取。
2.送檢
(1)樣品必須貼上標簽,做到嚴密封閉包裝,注意安全,避免傾斜或破碎,盡快送檢。
(2)送檢樣品必須注明檢驗?zāi)康模瑯悠返膩碓?、名稱、件數(shù)、重量,采樣條件和時間,送檢時間、送檢人姓名和單位及需要說明的其他事項。
(3)染疫動物送檢時要有防蚤設(shè)施;易腐敗樣品如不能立即送檢,應(yīng)加以冷藏;特殊樣品應(yīng)放在保存液中運送。
(4)收到樣品后,及時核對登記,并盡快進行檢驗。發(fā)現(xiàn)錯誤立即與送檢人協(xié)商,采取彌補措施。
3.樣品的保存和處理
(1)重要檢驗的樣品或不易采集的樣品,應(yīng)保存一定數(shù)量,以備復(fù)查。
(2)不能立即檢驗的樣品,應(yīng)按要求妥善保存,防止污染、腐敗。
(3)檢驗完的微生物學樣品,經(jīng)當事檢驗者同意,采取適當方法消毒處理后,方可遺棄。
(4)樣品在檢驗結(jié)束后應(yīng)保留一定時間,以備復(fù)查。陽性樣品至少保存6個月,應(yīng)加封存放,防止變質(zhì)。易變質(zhì)食品及時處理。
(5)樣品最后處理,必須經(jīng)處(科)室領(lǐng)導(dǎo)同意后進行。
(三)檢驗結(jié)果的報告
1.填寫報告
(1)檢驗結(jié)束后,應(yīng)及時填寫檢驗報告單和檢驗記錄。
(2)檢驗報告應(yīng)按檢驗報告單的要求,逐項如實填寫。病因檢查結(jié)果用“檢出”、“未檢出”;實驗結(jié)果用“陽性”、“陰性”。測定量數(shù)值,在定值中只保留一位可疑數(shù)字,有效數(shù)位數(shù)確定后,用“四舍五入”取舍規(guī)則定最后一位數(shù)。
2.簽發(fā)、復(fù)核報告
(1)一般檢驗報告由檢驗者簽發(fā),重要檢驗報告須經(jīng)主管檢驗負責人復(fù)核后簽發(fā)。
(2)報告結(jié)論應(yīng)客觀真實。發(fā)現(xiàn)檢疫傳染病或監(jiān)測傳染玻灸病原體時,應(yīng)按國家規(guī)定的初步檢驗報告和確診檢驗報告的時限及時簽發(fā)檢驗報告。
(四)精密儀器的管理和使用
1.新購進的儀器要認真檢查,應(yīng)由專人負責登記造冊,建立儀器管理、使用檔案。
2.嚴格按照操作規(guī)程使用儀器。熟練掌握儀器使用方法。
3.儀器要安全、靈敏,保持清潔,定期維修。做到防塵、防曬、防潮、防腐蝕。
4.建立儀器使用制度,大型精密儀器由專人專室使用和維護保養(yǎng)。
5.除有專業(yè)人員外,不得拆卸儀器,發(fā)現(xiàn)故障時,應(yīng)立即停止使用并請有關(guān)人員檢修。
(五)藥品、試劑的保管使用
1.劇毒、危險藥品的保管
(1)劇毒及危險藥品要包裝嚴密,標簽清晰,設(shè)專柜存放,加鎖,由專人管理。做好出入登記,經(jīng)常檢查核實。發(fā)放藥品應(yīng)認真核對。
(2)藥品應(yīng)按其性質(zhì)分別排列存放,存放地點要按公安消防部門的要求制定安全防范措施。
2.試劑配制的要求
(1)試劑配制方法所需的藥品,應(yīng)達到檢驗要求的純度。
(2)試劑配制方法必須按操作規(guī)程進行,如采用新方法配制試劑,須經(jīng)主管檢驗負責人批準后,方可進行。
(3)新配制的試劑必須進行核對鑒定,合格后方可使用。
(4)試劑的標簽一律用鋼筆書寫,注明試劑的名稱、濃度、配制時間及有效期限。注意防止標簽脫落。
(5)怕光試劑應(yīng)放在棕色瓶中。經(jīng)常檢查試劑,發(fā)現(xiàn)變質(zhì),立即更換。
(六)檢驗質(zhì)量控制
檢驗使用的方法必須靈敏度高、特異性強、檢出率高、漏檢率低。要經(jīng)??偨Y(jié)經(jīng)驗,解決疑難問題,推廣新技術(shù),應(yīng)用新方法。要有完整的檢驗記錄,作為質(zhì)量檢查的依據(jù)。
1.實驗必須按實驗操作規(guī)程進行;
2.實驗器材和儀器設(shè)備在使用前必須經(jīng)過校正;
3.使用標準試劑做實驗對照;
4.標準試劑必須符合實驗要求,并注意生產(chǎn)單位、批號及有效期;
5.檢驗結(jié)果應(yīng)準確無誤;
6.按規(guī)定的方法計算檢驗結(jié)果;
7.檢驗報告必須按簽發(fā)、復(fù)核規(guī)定及時發(fā)出;
8.實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制應(yīng)定期進行。
衛(wèi)檢總監(jiān)字〔1989〕第235號 1989年12月6日)
為加強國境衛(wèi)生檢疫檢驗工作,使其科學化、規(guī)范化、標準化,我們組織有關(guān)專業(yè)人員,整理了《國境衛(wèi)生檢疫檢驗方法》和制定了《國境衛(wèi)生檢疫檢驗規(guī)程》(試行),現(xiàn)發(fā)給你們參照執(zhí)行。望總結(jié)經(jīng)驗并將執(zhí)行過程中遇到的問題和改進意見及時報總所。
國境衛(wèi)生檢疫檢驗方法
目錄
一、健康檢查檢驗方法
(一)ABO血型檢驗方法
(二)谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢驗方法
(三)乙肝表面抗原檢驗方法
(四)食品飲用水從業(yè)人員帶菌檢查檢驗方法
(五)腹瀉病病原體檢驗方法
(六)紅細胞沉降率檢驗方法
二、禁止入境的傳染病檢驗方法
(一)梅毒血清抗體檢驗方法
(二)淋病雙球菌檢驗方法
(三)結(jié)核桿菌檢驗方法
(四)麻瘋桿菌檢驗方法
(五)艾滋病血清抗體檢驗方法(HIV檢驗方法)
三、檢疫傳染病檢驗方法
(一)鼠疫耶爾森氏菌檢驗方法
(二)霍亂弧菌檢驗方法
(三)黃熱病病毒檢驗方法
四、監(jiān)測傳染病檢驗方法
(一)流感病毒檢驗方法
(二)瘧原蟲檢驗方法
(三)斑疹傷寒立克次體檢驗方法
(四)回歸熱螺旋體檢驗方法
(五)登革熱病毒檢驗方法
(六)流行性出血熱病毒檢驗方法
(七)脊髓灰質(zhì)炎病毒檢驗方法
(八)天花病毒檢驗方法
(九)埃波拉馬爾堡病毒檢驗方法
(十)拉沙熱病毒檢驗方法
(十一)軍團菌檢驗方法
五、食品衛(wèi)生檢驗方法和標準(詳見《中華人民共和國食品衛(wèi)生標準》)
(一)糧食衛(wèi)生標準
(二)食用植物油衛(wèi)生標準
(三)鮮肉衛(wèi)生標準
(四)凍肉衛(wèi)生標準
(五)咸肉衛(wèi)生標準
(六)熟肉制品衛(wèi)生標準
(七)鮮蛋衛(wèi)生標準
(八)加工蛋制品衛(wèi)生標準
(九)乳及乳制品衛(wèi)生標準
(十)茶類衛(wèi)生標準
(十一)糖類衛(wèi)生標準
(十二)糕點、餅干、面包衛(wèi)生標準
(十三)冷飲食品及汽酒衛(wèi)生標準
(十四)罐頭衛(wèi)生標準
(十五)水產(chǎn)品衛(wèi)生標準
(十六)調(diào)味品衛(wèi)生標準
(十七)醬腌菜衛(wèi)生標準
(十八)豆制品及淀粉類衛(wèi)生標準
(十九)蒸餾酒及配制酒衛(wèi)生標準
(二十)發(fā)酵酒衛(wèi)生標準
(二十一)食品添加劑使用衛(wèi)生標準
(二十二)食品中氟允許量標準
(二十三)食品中鎘允許量標準
(二十四)食品總砷、無機砷允許量標準
(二十五)食品中汞允許量標準
(二十六)糧食、蔬菜、肉、蛋等食品中“六六六”、“滴滴涕”衛(wèi)生標準
(二十七)食品中甲拌磷、希螟硫磷、倍硫磷殘留量衛(wèi)生標準
(二十八)食品中敵敵畏、樂果、馬拉硫磷、對硫磷允許殘留標準
(二十九)食品中黃曲霉毒素B1允許量標準
(三十)熏烤動物性食品中苯并芘允許限量標準
(三十一)食具容器包裝材料衛(wèi)生標準
六、餐茶具衛(wèi)生檢驗方法
七、生活飲用水衛(wèi)生要求
八、食品貯藏衛(wèi)生要求
九、環(huán)境衛(wèi)生要求
(一)污水排放衛(wèi)生要求
(二)空氣衛(wèi)生要求
(三)餐茶具洗滌消毒衛(wèi)生要求
(四)供水設(shè)備衛(wèi)生要求
一、健康檢查檢驗方法
(一)ABO血型檢驗方法
1、方法
玻片凝集法
標準血清系指用抗A抗B單克隆標準抗血清
2、結(jié)果判定
────────────┬───────────────────────
標準血清 │ 凝集現(xiàn)象
────────────┼───────────────────────
抗A │+ ?。 。 。?/p>
抗B │- + ?。 。?/p>
受檢者血型 │A B AB O
────────────┴───────────────────────
+凝集?。撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸撸摺?-不凝集
────────────────────────────────────
(二)谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢驗方法
1 方法
GPT賴氏法
2 結(jié)果判定
────────────┬───────────────────────
方法 │正常值
────────────┼───────────────────────
賴氏法 │0-25單位
────────────┴───────────────────────
(三)乙型肝炎表面抗原檢驗方法
1 方法
1.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
1.2 反向間接血凝反應(yīng)(RPHA)
2 結(jié)果判定
───┬────────────────────┬───────────
方法 │ 血球凝集反應(yīng) │
├────────────────────┤結(jié)果判定
│1:2 1:4 1:8 1:8以上│
───┼────────────────────┼───────────
反向間│++↑ ?。?uarr; ?。?uarr; ?。?uarr; │陽性(++)
接血凝│++↑ ++↑ ?。?uarr; ?。?darr; │可疑(+-)
反應(yīng) │++↑ ?。?uarr; ?。?darr; ?。 々﹃幮裕ǎ?/p>
───┴────────────────────┴───────────
+凝集 ↑以上 ↓以下
必要時作中和試驗
────────┬────────────────┬──────────
方法 │ 判定方法 │結(jié)果判定
────────┼────────────────┼──────────
酶聯(lián)免吸附試驗 │目測:棕黃色 │陽性
│比色: │≥2.1:陽性
│ 樣品OD值 │<2.1:陰性
│PN=─────────────│
│ 陰性對照平均OD值 │
────────┴────────────────┴──────────
(四)食品飲用水從業(yè)人員帶菌檢查檢驗方法
1 項目
霍亂弧菌、志賀氏菌、沙門氏菌
2 方法
增菌,分離培養(yǎng),生化學、血清學鑒定
3 結(jié)果
不得檢出
(五)腹瀉病病原體檢驗方法
1 項目
霍亂弧菌、志賀氏菌、沙門氏菌、副溶血性弧菌、致病性大腸桿菌、侵襲性大腸桿菌、產(chǎn)毒性大腸桿菌、空腸彎曲菌、結(jié)腸炎耶爾森氏菌、輪狀病毒
2 方法
增菌、分離、培養(yǎng)、鑒定
3 結(jié)果
檢出××病原體;××病原體未檢出。
(六)紅細胞沉降率檢驗方法
1 方法
魏氏法
2 結(jié)果判定
────────┬───────────────────────────
方法 │正常檢驗指標
────────┼───────────────────────────
魏氏法 │男性 0-15mm/H
│女性 0-20mm/H
────────┴───────────────────────────
二、禁止入境的傳染病檢驗方法
(一)梅毒血清抗體檢驗方法
1 方法
1.1 血清反應(yīng)素試驗(USR)
1.2 梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)
1.3 熒光螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)
2 結(jié)果判定
2.1 USR
────────────────────────────────────
反應(yīng)程度 結(jié)果判定
────────────────────────────────────
中等或大的塊狀物 陽性反應(yīng)(++)↑
顆粒不規(guī)則細小粒狀 弱陽性反應(yīng)(+-)
均勻分布無塊狀物 陰性反應(yīng)(-)
────────────────────────────────────
2.2 TPHA
────────────────────────────────────
陽性 ?。?:80
可疑 1:80(+-)需復(fù)驗
陰性 ?。?:80
────────────────────────────────────
2.3 FTA-ABS
────────────────────────────────────
熒光強度 結(jié)果判定
────────────────────────────────────
翠綠色熒光(++)↑ 陽性
黃綠色熒光(+) 可疑
熒光不顯(+-) 陰性
────────────────────────────────────
健康檢查USR陽性時,需做TPHA,陽性時才能確診。
(二)淋病雙球菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片染色鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 生化試驗鑒定
2 結(jié)果判定
2.1 形態(tài)特點:卵圓形或圓形,成對排列常位于細胞中。
2.2 菌落半透明灰白色邊緣花瓣狀。
2.3 生化試驗:過氧化氫酶,氧化酶陽性葡萄糖產(chǎn)酸即可判定。
(三)結(jié)核桿菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片抗酸染色鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 動物試驗
2 結(jié)果判定
2.1 檢出抗酸性菌。
2.2 3-4周生長粗糙型菌落為陽性。
2.3 動物試驗3-4周接種部位附近淋巴結(jié)腫大為陽性。
(四)麻瘋桿菌檢驗方法
1 方法
1.1 直接涂片抗酸染色鏡檢100個視野
1.2 動物試驗
1.3 麻瘋菌素反應(yīng)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢結(jié)果
2.1.1 陰性(-):檢查100個視野無麻瘋桿菌。
2.1.2 陽性(+):每個視野查到1個或<1個麻瘋桿菌。
2.1.3 陽性(++):每個視野均可查到麻瘋桿菌。
2.1.4 陽性(+++):每個視野均可查到許多麻瘋桿菌。
2.2 動物試驗:豚鼠接種不發(fā)病。
2.3 麻瘋菌素反應(yīng):出現(xiàn)紅斑>10mm為陽性。
(五)艾滋病血清抗體檢驗方法
1 項目
HIV抗體檢測
2 方法
2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2.2 間接免疫熒光試驗(IFA)
2.3 明膠顆粒凝集試驗(PA)
2.4 蛋白印跡試驗(WB)
3 結(jié)果判定
3.1 ELISA:OD值≥cOT OFF值表示有反應(yīng),應(yīng)復(fù)驗1次,如重復(fù)陽性,可認為HIV抗體陽性。
3.2 IFA:細胞漿和細胞膜呈綠色熒光為陽性。
3.3 PA:
────────────────────────────────────
陽性(+) 1:32 發(fā)生顆粒凝集
可疑(+-) ?。?:32 顆粒凝集不顯
陰性(-) 均不發(fā)生凝集反應(yīng)
────────────────────────────────────
3.4 WB:出現(xiàn)P24或GP41帶形,同時出現(xiàn)其他帶形,為陽性,即可確診。
三、檢疫傳染病檢驗方法
(一)鼠疫耶爾森氏菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)鑒定
1.3 噬菌體試驗
1.4 動物試驗
1.5 沉淀反應(yīng)
1.6 被動血凝試驗
1.7 反向血凝試驗
1.8 抗體中和試驗
1.9 免疫熒光檢查
2 結(jié)果報告
2.1 初報:2小時內(nèi)涂片染色報告。
2.2 疑似報告:36小時內(nèi)報告形態(tài)、血清學試驗、噬菌體試驗結(jié)果。
2.3 最終報告:初發(fā)鼠疫于72小時內(nèi)經(jīng)四步檢查結(jié)果報告。
(二)霍亂弧菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片、染色
1.2 動力觀察及制動試驗
1.3 分離培養(yǎng)
1.4 生化試驗
1.5 血清學試驗
1.5.1 玻片凝集試驗
1.5.2 試管定量凝集試驗
1.6 噬菌體試驗
2 結(jié)果報告
2.1 初報:涂片形態(tài)動力觀察制動試驗2小時內(nèi)報告。
2.2 疑似報告:增菌培養(yǎng)狀況,玻片凝集試驗10小時內(nèi)報告。
2.3 初步鑒定:結(jié)合形態(tài)、培養(yǎng)性狀,18小時內(nèi)報告。
2.4 確定報告:根據(jù)鑒定試驗、鑒別試驗,48小時內(nèi)報告。
(三)黃熱病病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 雞胚接種
1.1.3 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 抗體中和試驗
1.2.2 補體結(jié)合試驗
1.2.3 血凝及血凝抑制試驗
1.3 病理組織切片
2 結(jié)果判定
2.1 初步鑒定報告:動物試驗,血清學試驗呈陽性反應(yīng),中和指數(shù)>50。雙份血清滴度增高4倍以上。
2.2 最終確定報告:分離病毒,傳代實驗動物的血清學試驗及病理組織學切片檢查結(jié)果。
四、監(jiān)測傳染病檢驗方法
(一)流感病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 雞胚接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 血凝及血凝抑制試驗
1.2.2 紅細胞吸附及吸附抑制試驗
1.2.3 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
1.3 免疫熒光抗體快速診斷
2 結(jié)果判定
2.1 快速診斷:直接涂片熒光染色,熒光細胞3個以上為陽性,1至2個為可疑,無特異熒光為陰性。
2.2 分離出病毒,用已知標準免疫血清確定甲、乙、丙三型和亞型。
2.3 血清學試驗:雙份血清抗體滴度比增長4倍為陽性。ELISA雙份血清滴度比增長4倍為陽性。ELISA雙份血清滴度比值的負對數(shù)ED值>0.5為陽性,<0.1為陰性。
(二)瘧原蟲檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 血清學試驗
1.2.1 瓊脂擴散試驗
1.2.2 被動血凝試驗
1.2.3 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 涂片找到各期瘧原蟲,應(yīng)報告發(fā)育時期及瘧原蟲的種類。
2.2 瓊脂擴散試驗形成白色沉淀線為陽性。
2.3 標準瘧原蟲抗原致敏血球,與被測血清所凝集為陽性。
2.4 免疫熒光陽性:呈明亮熒光。
2.5 ELISA陽性:形成復(fù)合物而顯黃棕色。
(三)斑疹傷寒立克次氏體檢驗方法
1 方法
1.1 直接檢查法
1.1.1 姬氏染色法
1.1.2 免疫熒光染色
1.2 病原體分離
1.2.1 豚鼠接種
1.2.2 雞胚接種
1.3 血清學試驗
1.3.1 外斐氏反應(yīng)
1.3.2 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.3.3 間接血凝試驗
1.3.4 間接免疫熒光試驗(IFA)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢:立克次體短小、單個、成雙或成堆紅色,熒光染色呈黃綠色熒光。
2.2 豚鼠呈發(fā)熱反應(yīng),直接檢查可查立克次體,臟器懸液為抗原做血清反應(yīng),呈陽性。
2.3 雞胚卵黃囊膜涂片,可查出立克次體。
2.4 血清學試驗:雙份血清滴度增高4倍以上為陽性。外斐氏反應(yīng)>1:160有診斷意義,補體結(jié)合試驗>1:8,間接血凝試驗>1:400,間接免疫熒光試驗呈綠色熒光顆粒為陽性。
(四)回歸熱螺旋體檢驗方法
1 方法
1.1 直接檢查
1.2 染色鏡檢
1.3 動物接種
1.4 雞胚接種
2 結(jié)果判定
───────────┬────────────────────────
方法 │ 結(jié)果判定
───────────┼────────────────────────
鏡檢 │發(fā)現(xiàn)有柔軟長絲狀,具有5-7個不規(guī)則疏松螺旋體
雞胚或動物接種 │發(fā)現(xiàn)有螺旋體生長
───────────┴────────────────────────
(五)登革熱病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 乳鼠接種
1.2 中和試驗
1.3 補體結(jié)合試驗(CFT)
1.4 血凝抑制試驗
2 結(jié)果判定
────────┬───────────────────────────
方法 │ 結(jié)果判定
────────┼───────────────────────────
中和試驗 │單份血清中和指數(shù)>50為陽性
補體結(jié)合試驗 │效價≥1:32為陽性,恢復(fù)期血清比急性期血清增長4倍。
血凝抑制試驗 │效價≥1:2560為陽性,恢復(fù)期比急性期血清增長4倍。
────────┴───────────────────────────
(六)流行性出血熱檢驗方法
1 方法
1.1 間接免疫熒光試驗
1.2 血凝抑制試驗
2 結(jié)果判定
2.1 間接免疫熒光:血清滴加抗原片上出現(xiàn)翠綠色熒光顆粒為陽性。
(七)脊髓灰質(zhì)炎病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 中和試驗
1.2.2 ELISA
1.3 免疫熒光法快速診斷
2 結(jié)果判定
2.1 小白鼠接種:出現(xiàn)典型癥狀或有規(guī)律死亡為陽性。
2.2 組織培養(yǎng):病變(++)細胞>50%為陽性。
2.3 中和試驗:雙份血清滴度增長4倍。
2.4 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
2.5 快速診斷:DFA:陽性時胞漿中呈彌散性翠綠色熒光,部分顆粒性,有的呈大球形熒光包涵體。
(八)天花病毒檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 病毒分離
1.2.1 雞胚接種
1.2.2 動物試驗
1.3 血清學試驗
1.3.1 絮狀沉淀試驗
1.3.2 血凝抑制試驗
1.3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 鏡檢:天花病毒原生小體大量存在,判定為陽性。
2.2 雞胚接種:痘斑試驗陽性,絨毛尿囊膜有白點病灶。
2.3 動物試驗:鮑氏試驗陽性,家兔角膜吳透明小圓泡炎癥變化。
2.4 血清學試驗:雙份血清滴度增高4倍,絮狀沉淀試驗:呈現(xiàn)絮狀沉淀為陽性。
(九)埃波拉馬爾堡病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 動物試驗:小白鼠、豚鼠、猴皆能發(fā)病。
2.2 VERO單層細胞:陽性時細胞病變病毒生長。
2.3 IFA:血清抗體陽性,出現(xiàn)翠綠色熒光顆粒。
2.4 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
(十)拉沙熱病毒檢驗方法
1 方法
1.1 病毒分離
1.1.1 動物接種
1.1.2 組織培養(yǎng)
1.2 血清學試驗
1.2.1 中和試驗
1.2.2 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 動物試驗:小白鼠4日后發(fā)病死亡。
2.2 組織培養(yǎng):VERO-E6細胞產(chǎn)生病變,單個細胞壞死,分布不均,呈巢穴狀。
2.3 中和試驗:小白鼠中和指數(shù)<9為陰性,>50為陽性。雙份血清明顯增長。蝕斑抑制中和試驗:蝕斑減少>80%為陽性。
2.4 IFA:陽性時在細胞漿內(nèi)呈點狀顆粒狀熒光,或分布在核內(nèi)。
2.5 ELISA:界限值P/N>2為陽性。
(十一)軍團菌檢驗方法
1 方法
1.1 涂片鏡檢
1.2 分離培養(yǎng)
1.3 動物接種
1.4 血清學試驗
1.4.1 間接免疫熒光試驗(IFA)
1.4.2 微量凝集試驗(MAT)
1.4.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
2 結(jié)果判定
2.1 姬美耐染色:菌體為紅色,鍍銀染色呈黑棕色,多形性桿菌狀,多數(shù)在吞噬細胞內(nèi)。DFA染色呈亮綠熒光。
2.2 CO2中培養(yǎng)5天,灰白、濕潤、有光澤、質(zhì)軟菌落,產(chǎn)褐色素,明膠液化,水解馬尿酸,氧化酶陽性。
2.3 血清學試驗:雙份血清呈4倍增長,≥1:128為陽性,MAT抗體滴度>1:16為陽性。ELISA校正OD值≥0.3為陽性。
六、餐茶具衛(wèi)生檢驗方法
1 方法
1.1 濾紙貼附法
1.2 生理鹽水洗滌、涂擦法
2 項目與指標
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
細菌總數(shù) │<20個/平方厘米
大腸菌群 │不得檢出/50平方厘米
────────────┴───────────────────────
七、生活飲用水衛(wèi)生要求
1 項目
1.1 感官性狀
1.2 細菌學檢查
1.3 理化檢查
2 水質(zhì)標準和衛(wèi)生要求
────────────┬───────────────────────
項目 │ 標準
────────────┼───────────────────────
1.感官性狀和一般化學 │
指標: │
色 │色度不超過15度,并不得呈現(xiàn)其它異色
混濁度 │不超過3度,特殊情況不超過5度
溴和味 │不得有異嗅、異味
肉眼可見物 │不得含有
PH │6.5-8.5
總硬度 │450mG/L
?。ㄒ蕴妓徕}計) │
鐵 │0.3mG/L
錳 │0.1mG/L
銅 │1.0mG/L
鋅 │1.0mG/L
揮發(fā)酚類 │0.002mG/L
(以苯酚計) │
陽離子合成洗滌劑 │0.3mG/L
硫酸鹽 │250mG/L
氯化物 │250mG/L
溶解性總固體 │1000mG/L
2.毒理學指標: │
氟化物 │1.0mG/L
氰化物 │0.05mG/L
砷 │0.05mG/L
硒 │0.01mG/L
汞 │0.001mG/L
鎘 │0.01mG/L
鉻(六價) │0.05mG/L
鉛 │0.05mG/L
銀 │0.05mG/L
硝酸鹽(以氮計) │20mG/L
氯仿 │60UG/L
四氯化碳 │3UG/L
苯并(A)芘 │0.01UG/L
滴滴涕 │1UG/L
六六六 │5UG/L
3.細菌學指標: │
細菌總數(shù) │小于100個/mL
總大腸菌群 │小于3個/L
游離余氯 │末梢水不應(yīng)低于0.05mG/L在接觸30分鐘
│后不低于0.3mG/L
4.放射性指標: │
總α放射性 │0.1Bq/L
總β放射性 │1Bq/L
────────────┴───────────────────────
八、食品貯藏衛(wèi)生要求
1 項目
1.1 溫度
1.2 濕度
2 溫、濕度指標
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
冷凍食品:溫度 │-10―-12℃
相對濕度 │85%-92%
魚肉暫存:溫度 │0-3℃
相對濕度 │85%-88%
蛋品:溫度 │1-3℃
相對濕度 │85%-88%
水果、蔬菜:溫度 │7-10℃
相對濕度 │85%-95%
牛乳 │5-7℃
糧油干貨 │陰涼干燥,溫度最高允許28℃
消毒后食品,開罐食品、 │5-7℃
牛乳及熟食品 │
────────────┴───────────────────────
九、環(huán)境衛(wèi)生檢驗要求
?。ㄒ唬┪鬯欧判l(wèi)生要求
────────────┬───────────────────────
項目 │ 指標
────────────┼───────────────────────
五日生化需氧量 │ ≤ 50
懸浮物 │ ≤ 150
大腸菌群 │ ≤ 250個/100mL
────────────┴───────────────────────
(二)空氣衛(wèi)生要求
────────────────────────────────────
項目 指標
────────────────────────────────────
二氧化碳(mG/立方米) ≤0.15
一氧化碳(mG/立方米) ≤10
細菌總數(shù)(個/立方米)
夏季 ≤4500
冬季 ≤6000
甲、乙鏈球菌(個/立方米) ≤36
────────────────────────────────────
(三)餐茶具洗滌消毒衛(wèi)生要求
────────────────────────────────────
項目 指標
────────────────────────────────────
蒸汽柜溫度 77℃ 15分
91℃ 5分
洗滌熱水溫度 >77℃
洗手水溫度 43-49℃
────────────────────────────────────
(四)供水設(shè)備衛(wèi)生要求
每月消毒一次,游離余氯0.2PPm,不少于20分。
國境衛(wèi)生檢疫檢驗規(guī)程
(試行)
一、檢驗工作任務(wù)和內(nèi)容
檢驗工作是衛(wèi)生檢疫一項技術(shù)性很強的工作。其主要任務(wù)是:為檢疫查驗、傳染病監(jiān)測、衛(wèi)生監(jiān)督、衛(wèi)生處理、隔離、留驗、醫(yī)療急救等工作及時、準確地提供檢驗結(jié)果和監(jiān)測數(shù)據(jù),為衛(wèi)生檢疫工作提供科學依據(jù)。
檢驗工作的主要內(nèi)容:
(一)負責現(xiàn)場樣品采集工作,及時檢驗,報告檢驗結(jié)果以及簽發(fā)檢驗單證。
(二)對檢疫傳染病和監(jiān)測傳染玻救各種病原體微生物進行分離和鑒定。
(三)地國境口岸和入出境交通工具上的食品、飲用水進行細菌學和理化檢驗。
(四)負責國境口岸的醫(yī)學動物所帶病原體的分離和鑒定。
(五)負責健康檢查的檢驗工作。
(六)負責國境口岸的醫(yī)療急救及門診的臨床檢驗工作。
(七)負責進口食品檢驗工作。
(八)開展有關(guān)疾病監(jiān)測、衛(wèi)生監(jiān)督和衛(wèi)生處理等科學研究工作。
二、實驗室規(guī)章制度
(一)微生物實驗室
1.設(shè)無菌接種室、培養(yǎng)基制作室、洗滌消毒室、微生物檢查室等。
2.室內(nèi)光線要充足,空氣流通,溫、濕度適宜,安靜清潔,無蚊、無蠅。
3.實驗室出入口放置腳擦墊,用消毒液浸泡,進入室內(nèi)必須穿白大衣,戴白帽,換拖鞋,作好自身防護。
4.遵守各項實驗操作規(guī)程,操作危險活菌應(yīng)在固定地點進行,臺面要鋪好浸泡消毒溢的紗布墊,工作完畢將紗布墊浸泡在消毒液中,并消毒洗手。
5.吸取標本必須用有橡皮吸頭、塞有棉花的無菌吸管,用過的吸管放在消毒液中。
6.用過的染菌器材和污物經(jīng)滅菌處理后,方可遺棄。
7.打破染菌器材時,應(yīng)迅速采取適當消毒措施,對污染點進行消毒,并向領(lǐng)導(dǎo)報告。
8.需要保留的菌種,應(yīng)按菌種保管要求妥善保存。不得隨意送出。
(二)強毒菌檢驗室
1.強毒菌檢驗室,應(yīng)有嚴格的防鼠、防蚤設(shè)施。
2.強毒菌檢驗必須雙人操作,檢驗人員要穿好防護服裝。
3.已知毒菌種的動物接種、解剖或菌種密封,檢驗人員要戴有機玻璃面罩或眼鏡。
4.工作完畢后,檢驗人員必須做終末消毒,方準離開實驗室。
(三)病毒檢驗室
1.設(shè)有隔離的實驗室,一切有污染性的實驗應(yīng)在指定實驗室內(nèi)進行。
2.進入實驗室必須穿工作服、換鞋。操作中所用材料和器械必須就地進行消毒處理,實驗完畢作終末消毒后,方準離開實驗室。
3.實驗室必須安裝紫外線消毒設(shè)備,實驗前后均用紫外線照射30分鐘以上。
4.發(fā)生病毒污染時,立即采取有效措施進行處理,并向領(lǐng)導(dǎo)匯報。
(四)理化檢驗室
1.設(shè)化學分析室、儀器分析室、秤量室等。要求清潔整齊,溫、濕度適宜。
2.定量器材在使用前應(yīng)按規(guī)定進行清洗、校正,試劑的純度符合檢驗要求。
3.劇毒、易燃、易爆品應(yīng)專人保管,防止發(fā)生事故。
4.要嚴格按操作規(guī)程使用儀器,定期對儀器進行維修檢查。
5.測定樣品時,必須做平等實驗,取平均值計算報告。
(五)臨床檢驗室
1.室內(nèi)保持清潔安靜。操作嚴肅認真,按操作規(guī)程進行。
2.采血時,要態(tài)度和藹,動作輕快,注意安全。
3.檢驗報告,應(yīng)按規(guī)定時間發(fā)出。急診報告優(yōu)先發(fā)出。
4.發(fā)現(xiàn)重要意義的檢驗結(jié)果,應(yīng)立即通知體檢工作人員,以便及時處理,并向領(lǐng)導(dǎo)匯報。
(六)免疫檢驗室
1.室內(nèi)光線充足,溫、濕度適宜,有足夠電源插座。
2.實驗應(yīng)選擇特異性強、靈敏度高的特異性診斷血清、試劑盒的方法。
3.血清、免疫學實驗存在多種干擾因素,易出現(xiàn)假陽性,必要時進行復(fù)驗
,并進一步做確證實驗。
4.洗滌血球一定要洗滌三次。血球上清液不得有溶血跡象,補體使用時在做正式實驗同時,必須做補體效價滴定。
5.實驗用的玻璃器材需仔細選擇,選用中性、硬質(zhì)玻璃器材,能耐酸、耐高溫、透明度強,以利于觀察結(jié)果。
(七)動物實驗室
1.實驗動物應(yīng)由專職人員進行標準化飼養(yǎng)、繁殖。室內(nèi)應(yīng)保持清潔整齊和適宜溫、濕度,無鼠、無蚊、無蠅。
2.選擇符合實驗要求的純種、健康動物,進行單獨飼養(yǎng),嚴格消毒,隔離及檢疫。
3.動物實驗必須按照實驗操作規(guī)程或?qū)嶒炘O(shè)計進行。
4.實驗動物要進行分組編號,標記在不易脫落、明顯的部位。實驗動物用的容器應(yīng)有明顯的標簽,每天核對動物數(shù)目,如有減少,查明原因并及時處理。
5.實驗用過的動物,不準放回動物飼養(yǎng)室。
(八)病媒昆蟲實驗室
1.設(shè)飼養(yǎng)室和標本制作鑒定室,室內(nèi)應(yīng)有嚴格的防鼠、防蚤措施,防止其他昆蟲侵入室內(nèi)。
2.飼養(yǎng)室應(yīng)設(shè)有恒溫、恒濕裝置。備有遮光用的黑布窗簾。飼養(yǎng)器應(yīng)充足,固定專用。
3.飼養(yǎng)室有給水設(shè)備,給水必須隔夜脫氯,但不能超過兩天以上,殺蟲劑及其他揮發(fā)性藥物均不得攜入飼養(yǎng)室內(nèi)。
4.要詳細填寫飼養(yǎng)記錄,并注明飼養(yǎng)條件。
5.標本制作鑒定室應(yīng)溫度適宜、干燥,光線充足。標本有防霉、防蟲措施。定期檢查標本情況。
(九)毒理實驗室
1.室內(nèi)應(yīng)清潔整齊,無蠅、無鼠,發(fā)現(xiàn)鼠類禁用毒餌除鼠。進入室內(nèi)要穿工作服。
2.實驗動物應(yīng)選擇標準動物,選用標準飼料。一次實驗用全程飼料,備齊后方可開始實驗。
3.應(yīng)按實驗操作規(guī)程和實驗設(shè)計進行毒理學實驗,選用的方法靈敏、可靠。
4.實驗動物容器應(yīng)備有卡片,標明編號、分類編目、記錄進程和實驗內(nèi)容。
5.實驗動物應(yīng)按有標準毒物、無標準毒物及未知毒物等分類,認真觀察,每天詳細填寫實驗記錄。
6.毒理實驗樣品應(yīng)注意驗收、保存和使用。樣品中不得混有化學藥物和防腐劑。易變質(zhì)樣品應(yīng)及時冰凍、冷藏保存。
三、檢驗技術(shù)規(guī)程
(一)檢驗人員的管理
1.檢驗工作是科學性很強的工作,從事檢驗工作的人員要具有一定的政治和業(yè)務(wù)素質(zhì)及認真負責,實事求是的科學作風。
2.檢驗人員要經(jīng)常學習、吸收先進檢驗技術(shù),掌握各種檢驗理論和方法,熟悉各種實驗操作技術(shù)及注意事項,掌握常用儀器的原理、性能、構(gòu)造、使用和維護。
3.操作前做好檢驗項目、樣品和送檢單的核對。認真按照實驗規(guī)程操作,保證實驗結(jié)果的準確。
4.檢驗工作經(jīng)常接觸有毒、有害、有傳染性的樣品,檢驗人員要嚴格執(zhí)行各種操作規(guī)程,做好防護,加強消毒。
(二)樣品的采集、送檢和處理
1.采樣
(1)檢驗人員負責現(xiàn)場采樣工作,并做好采樣調(diào)查記錄,無采樣記錄的樣品,不得接受檢驗。
(2)采取細菌學檢驗的樣品,應(yīng)按無菌操作規(guī)程進行,并加強自身防護及防止病原菌傳播。
(3)采取數(shù)量以能反映被檢物的衛(wèi)生質(zhì)量和檢驗項目對樣品的需求為準。
(4)采取的樣品,呆具有代表性、均勻性。均質(zhì)樣品用3層5點方法采?。煌磕吮緫?yīng)多點采樣;各種水樣不少于1000毫升;尸體標本應(yīng)在死后6小時內(nèi)采取。
2.送檢
(1)樣品必須貼上標簽,做到嚴密封閉包裝,注意安全,避免傾斜或破碎,盡快送檢。
(2)送檢樣品必須注明檢驗?zāi)康模瑯悠返膩碓?、名稱、件數(shù)、重量,采樣條件和時間,送檢時間、送檢人姓名和單位及需要說明的其他事項。
(3)染疫動物送檢時要有防蚤設(shè)施;易腐敗樣品如不能立即送檢,應(yīng)加以冷藏;特殊樣品應(yīng)放在保存液中運送。
(4)收到樣品后,及時核對登記,并盡快進行檢驗。發(fā)現(xiàn)錯誤立即與送檢人協(xié)商,采取彌補措施。
3.樣品的保存和處理
(1)重要檢驗的樣品或不易采集的樣品,應(yīng)保存一定數(shù)量,以備復(fù)查。
(2)不能立即檢驗的樣品,應(yīng)按要求妥善保存,防止污染、腐敗。
(3)檢驗完的微生物學樣品,經(jīng)當事檢驗者同意,采取適當方法消毒處理后,方可遺棄。
(4)樣品在檢驗結(jié)束后應(yīng)保留一定時間,以備復(fù)查。陽性樣品至少保存6個月,應(yīng)加封存放,防止變質(zhì)。易變質(zhì)食品及時處理。
(5)樣品最后處理,必須經(jīng)處(科)室領(lǐng)導(dǎo)同意后進行。
(三)檢驗結(jié)果的報告
1.填寫報告
(1)檢驗結(jié)束后,應(yīng)及時填寫檢驗報告單和檢驗記錄。
(2)檢驗報告應(yīng)按檢驗報告單的要求,逐項如實填寫。病因檢查結(jié)果用“檢出”、“未檢出”;實驗結(jié)果用“陽性”、“陰性”。測定量數(shù)值,在定值中只保留一位可疑數(shù)字,有效數(shù)位數(shù)確定后,用“四舍五入”取舍規(guī)則定最后一位數(shù)。
2.簽發(fā)、復(fù)核報告
(1)一般檢驗報告由檢驗者簽發(fā),重要檢驗報告須經(jīng)主管檢驗負責人復(fù)核后簽發(fā)。
(2)報告結(jié)論應(yīng)客觀真實。發(fā)現(xiàn)檢疫傳染病或監(jiān)測傳染玻灸病原體時,應(yīng)按國家規(guī)定的初步檢驗報告和確診檢驗報告的時限及時簽發(fā)檢驗報告。
(四)精密儀器的管理和使用
1.新購進的儀器要認真檢查,應(yīng)由專人負責登記造冊,建立儀器管理、使用檔案。
2.嚴格按照操作規(guī)程使用儀器。熟練掌握儀器使用方法。
3.儀器要安全、靈敏,保持清潔,定期維修。做到防塵、防曬、防潮、防腐蝕。
4.建立儀器使用制度,大型精密儀器由專人專室使用和維護保養(yǎng)。
5.除有專業(yè)人員外,不得拆卸儀器,發(fā)現(xiàn)故障時,應(yīng)立即停止使用并請有關(guān)人員檢修。
(五)藥品、試劑的保管使用
1.劇毒、危險藥品的保管
(1)劇毒及危險藥品要包裝嚴密,標簽清晰,設(shè)專柜存放,加鎖,由專人管理。做好出入登記,經(jīng)常檢查核實。發(fā)放藥品應(yīng)認真核對。
(2)藥品應(yīng)按其性質(zhì)分別排列存放,存放地點要按公安消防部門的要求制定安全防范措施。
2.試劑配制的要求
(1)試劑配制方法所需的藥品,應(yīng)達到檢驗要求的純度。
(2)試劑配制方法必須按操作規(guī)程進行,如采用新方法配制試劑,須經(jīng)主管檢驗負責人批準后,方可進行。
(3)新配制的試劑必須進行核對鑒定,合格后方可使用。
(4)試劑的標簽一律用鋼筆書寫,注明試劑的名稱、濃度、配制時間及有效期限。注意防止標簽脫落。
(5)怕光試劑應(yīng)放在棕色瓶中。經(jīng)常檢查試劑,發(fā)現(xiàn)變質(zhì),立即更換。
(六)檢驗質(zhì)量控制
檢驗使用的方法必須靈敏度高、特異性強、檢出率高、漏檢率低。要經(jīng)??偨Y(jié)經(jīng)驗,解決疑難問題,推廣新技術(shù),應(yīng)用新方法。要有完整的檢驗記錄,作為質(zhì)量檢查的依據(jù)。
1.實驗必須按實驗操作規(guī)程進行;
2.實驗器材和儀器設(shè)備在使用前必須經(jīng)過校正;
3.使用標準試劑做實驗對照;
4.標準試劑必須符合實驗要求,并注意生產(chǎn)單位、批號及有效期;
5.檢驗結(jié)果應(yīng)準確無誤;
6.按規(guī)定的方法計算檢驗結(jié)果;
7.檢驗報告必須按簽發(fā)、復(fù)核規(guī)定及時發(fā)出;
8.實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制應(yīng)定期進行。
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